Optimisation de la méthode de mesure des endotoxines aéroportées dans l'air des lieux de travail : expériences utilisant des bioaérosols générés en laboratoire

Les endotoxines sont des composants de la membrane externe des bactéries qui peuvent se retrouver en suspension dans l’air lors d'activités professionnelles générant des aérosols et avoir des effets néfastes sur la santé des travailleurs. La filtration est la méthode d’échantillonnage recommandée par la norme EN 14031 pour les mesures d’endotoxines dans les atmosphères de travail. Cependant, il existe encore des différences en terme de pratique concernant certains paramètres de la méthode de mesure. Ainsi, le stockage des échantillons, la méthode d’extraction des endotoxines du filtre et le type de filtre sont des paramètres qui doivent encore être étudiés pour améliorer la récupération des endotoxines. A cette fin, des expériences de laboratoire ont été réalisées sur la base d'environ 20 générations indépendantes d’un aérosol d’endotoxine provenant d'une suspension de 3 bactéries Gram négatives cultivables. En utilisant un temps d'échantillonage fixe d'une heure, ce bioaérosol complexe a permis de couvrir des concentrations d’endotoxines allant de ~ 10 à ~ 10(exposant 4) EU/m3. En utilisant le test cinétique chromogénique LAL (Limulus Amebocyte Lysate), nos résultats montrent qu'une meilleure récupération des endotoxines est obtenue en utilisant 5 mL d’eau apyrogène par rapport à 10 mL, en particulier pour les filtres en fibre de verre, sans changement lorsque le temps d'agitation est réduit de 60 à 20 minutes. A l'exception du polychlorure de vinyle, le type de filtre (polycarbonate, Téflon ou fibre de verre) n'a pas une grande influence sur les concentrations mesurées. Cependant, les filtres en PVC ont systématiquement donné une concentration d'endotoxines plus faible que les autres. Enfin, par rapport au traitement immédiat de la cassette, le stockage des échantillons à température ambiante est possible jusqu'à 8 jours après le prélèvement sans altérer la quantité d'endotoxine mesurée. Ces améliorations rendent les résultats de la concentration d'endotoxines plus robustes et contribueront à déployer plus facilement cette méthode grâce à la simplification d'étapes du protocole et par le stockage, offrant ainsi une plus grande flexibilité aux analystes.