Validation de la méthode et caractérisation de l'incertitude associée à la quantification du Malondialdéhyde dans les condensats d'haleine expirée

Il existe plusieurs méthodes pour quantifier le malondialdéhyde (MDA), un biomarqueur du stress oxydatif, dans les condensats expirés (EBC). Cependant, du fait de la nature très diluée de cette matrice biologique, une forte variabilité est observée aux faibles concentrations. Nous avons cherché à optimiser un méthode à base de 2,4-dinitrophénylhydrazine utilisant la chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem et caractériser l'incertitude associée à cette méthode. Nous avons étudié les paramètres suivants pour la validation de la méthode : la linéarité de l'étalonnage, la limite de détection (LOD), la précision, la récupération et l'effet de matrice. Les résultats ont été utilisés pour identifier les principales sources d'incertitude et calculer l'incertitude combinée. L'applicabilité de cette méthode a été évaluée dans une étude épidémiologique en cours en analysant 164 échantillons d'EBC collectés auprès de différents groupes professionnels dans des environnements de métro. La méthode optimisée était sensible (LOD : 70 pg/mL), précise (variation inter-jours < 19 %) et exacte (plage de récupération : 92-106,5 %). L'incertitude analytique calculée était la plus élevée au niveau de la LOQ et atteignait 23 %. Bien que l'incertitude analytique soit élevée à de faibles concentrations de MDA, elle était significativement inférieure à celle de la variabilité interindividuelle observée. Par conséquent, cette méthode fonctionne suffisamment bien et peut être recommandée pour une utilisation future dans recherches épidémiologiques s'appuyant sur les différences inter-sujets.